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              RPE人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

              發(fā)布時(shí)間:2017-02-10瀏覽:1870次

              RPE人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 慧穎生物細(xì)胞庫(kù)2000多種類細(xì)胞株細(xì)胞系,熱賣中,ATCC原代細(xì)胞,ATCC培養(yǎng)基,繼續(xù)訂購(gòu)中,無需手續(xù),貨期:4-6周,*!歡迎下單

              細(xì)胞名稱:RPE人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

              組成:

              組份

              數(shù)目

              細(xì)胞

              1 T-25瓶

              細(xì)胞說明書

              一份

              細(xì)胞簡(jiǎn)介:

              生長(zhǎng)特性:

              貼壁處理

              細(xì)胞來源:

              從ATCC引進(jìn)/中科院/協(xié)和醫(yī)院等引進(jìn)

              培養(yǎng)液:

              1640或DMEM +10%FBS德國(guó)SERANA胎牛血清或GIBCO 16000-044胎牛血清

              細(xì)胞總數(shù):

              1~3*106

              傳代周期:

              2-3天

              傳代比例:

              1:2~1:4

              換液頻率:

              2-3天

              凍存液:

              90%FBS+10%DMSO

              細(xì)胞狀態(tài):

              良好

               

               

              注意事項(xiàng):

              對(duì)于貼壁細(xì)胞,若細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,換成新鮮的培養(yǎng)基;如細(xì)胞還不貼壁,將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。對(duì)于懸浮細(xì)胞:收到細(xì)胞后,將細(xì)胞全部離心,去掉舊的培養(yǎng)基,換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

              特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸,建議添加雙抗培養(yǎng))

              (1)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天有少量或沒有飄忽的細(xì)胞可以當(dāng)天換液,因?yàn)槁吠绢嶔ぴ斐纱罅匡h忽的情況時(shí),請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)

              (2)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長(zhǎng)不宜超過72小時(shí))

              (3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并SUER技術(shù)人員

              細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):

              1)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)特性生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

              2)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決

              3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

              細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)

              (1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?-2min)

              (2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存

              (3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

              (4)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞生長(zhǎng)特性邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让福?-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。

              請(qǐng)各位老師以隨貨說明為主

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