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              血清10099-141

              發(fā)布時(shí)間:2017-05-03瀏覽:2230次

              血清10099-141 2017年這個(gè)夏天如何選擇高品質(zhì),放心使用的血清?慧穎生物與您相伴,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中助您一臂之力。

              上海慧穎生物是一件專注細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)菌,真菌培養(yǎng)的一家公司,胎牛血清,無(wú)血清培養(yǎng)基,*培養(yǎng)基,不*培養(yǎng)基,添加因子,細(xì)胞株細(xì)胞系,ATCC原代細(xì)胞代購(gòu),ELISA試劑盒,動(dòng)物疫病診斷試劑盒,農(nóng)殘?jiān)噭┖校贵w,SIGMA現(xiàn)貨產(chǎn)品,折扣好,到貨快速!

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              胎牛血清FBS (fetal bovine serum):心臟穿刺的方法采血。剖腹產(chǎn)胎牛,未接觸外界,血清中的抗體補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的有害成分zui少。

              新生牛血清:出生24小時(shí)內(nèi)

              小牛血清CS(calf serum):出生10-14天

              馬血清HS(horse serum)

              常用的血清廠家:GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone

              常用貨號(hào):10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等

              血清的溶解與保存

              1、如果不用,先放置-80 ℃保存。

              2、如果要用,可于4 ℃冰箱放置過(guò)夜,再在室溫溶解。

              3、溶解好的血清應(yīng)立即分裝,-80 ℃保存。

              4、保存于-80 ℃的血清解凍時(shí)應(yīng)先與4 ℃冰箱放置過(guò)夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。

              細(xì)胞傳代方法

              根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的恃點(diǎn),傳代方法有3種:

              1.懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

                 離心法傳代:離心(1000轉(zhuǎn)/分)去上清,沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。

                 直接傳代法:懸浮細(xì)胞沉淀在瓶壁時(shí),將上清培養(yǎng)液去除l/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。

              2.半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代(雜交瘤)

                 此類(lèi)細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象,但貼壁不牢,可用直接吹

              打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來(lái),進(jìn)行傳代。

              3.貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

                 采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。

              細(xì)胞冷凍保存

              1. 細(xì)胞應(yīng)生長(zhǎng)良好,處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,密度為80%左右。
                2.注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。 DMSO質(zhì)量要好,應(yīng)無(wú)菌且無(wú)色。
                3.  冷凍保存之細(xì)胞濃度:一般成纖維細(xì)胞1~3 x 106 cells/ml,懸浮細(xì)胞 5~10 x 106cells/ml,上皮細(xì)胞 2~5 x 106 。

              4.凍存液的配方是: 60%無(wú)血清培養(yǎng)液 30%血清 10% DMSO

               

              1. 冷凍方法:  4℃ 30-60 分鐘---> -80℃ 6H - 隔夜 ---> 液氮長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

              細(xì)胞生長(zhǎng)減慢

              提高血清濃度為15-20%;

              提高接種密度;

              細(xì)胞的離散度;

              添加細(xì)胞生長(zhǎng)因子;

              細(xì)胞不貼壁

              胰蛋白酶消化過(guò)度;

              支原體污染;

              培養(yǎng)液中無(wú)貼壁因子

              細(xì)胞傳代過(guò)程中出現(xiàn)碎片、顆粒、小黑點(diǎn)的原因

              排除細(xì)胞污染后主要有以下幾種可能:

              細(xì)胞長(zhǎng)老了,傳代時(shí)細(xì)胞已100%滿度,細(xì)胞衰老;

              消化時(shí)不*,吹打過(guò)度;

              血清溶解時(shí)直接從-80℃放到37 ℃或室溫;

               

              以上資料有上海慧穎生物市場(chǎng)部 王麗 編輯整理

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