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              定量檢測(cè)ELISA試劑盒使用注意事項(xiàng)

              發(fā)布時(shí)間:2012-07-04瀏覽:1476次

                【操作程序總結(jié)】
                
                準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
                
                加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
                
                洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
                
                洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘
                
                加入終止液
                
                15分鐘之內(nèi)讀OD值
                
                計(jì)算
                
                【檢測(cè)范圍】
                
                15.6-1000pg/ml
                
                【規(guī)格】
                
                96T/盒
                
                【貯藏】
                
                2-8℃,避光防潮保存。
                
                【有效期】
                
                6個(gè)月

                【樣本要求】
                
                1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
                
                2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
                
                3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
                
                【注意事項(xiàng)】
                
                1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
                
                2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
                
                3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
                
                4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
                
                5、本試劑盒定量范圍為15.6-1000pg/ml,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(15.6-1000pg/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
                
                6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
                
                7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
                
                8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。
                
                9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
                

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