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              清洗ELISA試劑盒時該注意的

              發(fā)布時間:2012-07-10瀏覽:1597次

                  ELISA試劑盒在試驗中是經(jīng)常用到的,使用的步驟之類也都耳熟能詳,但用后清洗就沒那么多人注意了,下面給大家介紹介紹要注意的事情。

                  操作注意事項
                1. 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。

                2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

                3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

                4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

                5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

                6. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。

                7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

                8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

                9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

              試驗原理
                試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

              自備材料
                1. 蒸餾水。

                2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

                3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

              安全性
                1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

                2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

                3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
               

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