【雞白介素3（IL-3）ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材白介素ELISA試劑盒】
       1、37℃恒溫箱ELISA試劑盒
       2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
       3、精密移液器ELISA試劑盒價(jià)格及一次性吸頭
       4、蒸餾水
       5、一次性試管
        6、吸水紙  上海ELISA試劑盒
      【雞白介素3（IL-3）ELISA試劑盒操作步驟】
       1、準(zhǔn)備禽ELISA試劑盒：從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
       2、配液：豬ELISA試劑盒用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
       3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對(duì)照孔不加。
        4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
        5、洗板：棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板）。
        6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。
        7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
        8、洗板：棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次（也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板）。
        9、顯色：每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s）,37℃避光顯色15min。
       10、終止：取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
       11、測(cè)定：以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值（OD值）。
       12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
      【雞白介素3（IL-3）ELISA試劑盒樣本要求】
       1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3）,因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。
       2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
       3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
      【雞白介素3（IL-3）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)】
       1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
       2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
       3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
       4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
       5、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/L,超過(guò)此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果（6.25-200ng/L范圍內(nèi)）,乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
        6、若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
        7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。
       8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。
       9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。

       本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被雞白介素3（IL-3）單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,豬ELISA試劑盒洗滌除去ELISA試劑盒價(jià)格未結(jié)合的成分,白介素ELISA試劑盒再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,ELISA試劑盒洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物（TMB）在辣根過(guò)氧化物酶（HRP）催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,禽ELISA試劑盒在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中雞白介素3（IL-3）濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中雞白介素3（IL-3）含量。 上海ELISA試劑盒