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              人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒|Kit說(shuō)明書(shū)

              發(fā)布時(shí)間:2013-08-29瀏覽:1707次

               人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRPELISA試劑盒|Kit說(shuō)明書(shū)

              產(chǎn)品名稱:人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA Kit

              別名:人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒;人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA酶免試劑盒;人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒

              英文名稱:Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit

              產(chǎn)品類型:酶免、ELISA Kit

              價(jià)格:1500

              種屬Human

              待測(cè)物名稱:calcitonin gene related peptide,CGRP

              縮寫(xiě):CGRP

              樣本類型:serum, plasma and tissue homogenates

              檢測(cè)范圍:2 ng/L -60 ng/L

              試劑盒性能:

              1.品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

              2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%15%

              保存溫度:4°C(三個(gè)月內(nèi)使用);-20°C(三個(gè)月后使用)

              有效期:4°C(保存6個(gè)月);-20°C(保存一年)

              標(biāo)本要求:

              1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

              2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

               

              注意:本試劑盒僅供科研使用

              使用目的:

              本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)含量。

              實(shí)驗(yàn)原理:

              本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)水平。用純化的人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP),再與HRP標(biāo)記的降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)濃度。

              試劑盒組成:

              1

              30倍濃縮洗滌液

              20ml×1

              7

              終止液

              6ml×1

              2

              酶標(biāo)試劑

              6ml×1

              8

              標(biāo)準(zhǔn)品(120 ng/L

              0.5ml×1

              3

              酶標(biāo)包被板

              12孔×8

              9

              標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

              1.5ml×1

              4

              樣品稀釋液

              6ml×1

              10

              說(shuō)明書(shū)

              1

              5

              顯色劑A

              6ml×1

              11

              封板膜

              2 

              6

              顯色劑B

              6ml×1/

              12

              密封袋

              1個(gè)

              操作步驟:

              1.      標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

              60 ng/L

              5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

              150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

              30 ng/L

              4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

              150μl5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

              15 ng/L

              3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

              150μl4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

              7.5 ng/L

              2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

              150μl3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

              3.75 ng/L

              1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

              150μl2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

               

              2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

              3.溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  

              4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

              5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

              6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

              7.溫育:操作同3。

              8.洗滌:操作同5。

              9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.

              10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

              11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

              計(jì)算:

                以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

              注意事項(xiàng):

              1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

              2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

              3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

              4 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

              5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

              6.底物請(qǐng)避光保存。

              7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

              8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

              9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

              10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

              上?;鄯f生物科技有限公司 版權(quán)所有    備案號(hào):滬ICP備12016933號(hào)-2

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