細(xì)胞名稱(chēng)

RAW264.7 小鼠單核細(xì)胞-巨噬胞

種屬

小鼠

組織來(lái)源

血液

生長(zhǎng)狀態(tài)

貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基類(lèi)型：DMEM培養(yǎng)基 90%

FBS: 10% 小牛血清

抗生素：雙抗

培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法

收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)：

如果沒(méi)長(zhǎng)滿(mǎn)，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法：

1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時(shí)觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

3 一般沒(méi)有特殊說(shuō)明，細(xì)胞一般是一傳二。

凍存方法

70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，先用現(xiàn)配。

儲(chǔ)存：液氮中長(zhǎng)期保存。

注

1 觀(guān)察細(xì)胞在低倍鏡下觀(guān)察，便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

2 在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等，請(qǐng)于一周內(nèi)與我們。